Пцр диагностика в гинекологии как берут

Пцр у женщин

ПЦР – полимеразная цепная реакция. Это генетический тест. Позволяет в собранном у пациента материале обнаружить ДНК(РНК) или части ДНК(РНК) инфекционного агента или дезоксирибонуклеазу (рибонуклеазу) самого пациента.

Амплификация – копирование коротких фрагментов ДНК микроорганизма. Осуществляется несколько раз в пределах одного температурного цикла в условиях специализированной лаборатории.

Свойства метода ПЦР:

• высокая точность и чувствительность метода
• специфичность (выделяют ДНК инфекционного агента, ДНК пациента и других микроорганизмов)
• универсальность выполнения лабораторного этапа исследования
• скорость выполнения ПЦР выше, чем при использовании столь же точного культурального метода (от 5 часов до суток)

ПЦР является достаточно точным анализом, используемым при постановке диагноза при любом инфекционном заболевании.

Когда результат трактуется как ложноотрицательный?

Если в крови, моче, мокроте или мазках нет следов возбудителя, так как микроорганизмов в принципе мало, или материал забран с нарушением требований к технике манипуляции. Ложноположительных результатов при выполнении полимеразной цепной реакции не бывает.

ПЦР не зависит от пола пациента, сдававшего данный материал.  Соответственно, по сути, Пцр у женщин ничем не отличается от ПЦР у мужчин.

Что нужно сдавать на ПЦР

Мазки:

• из мочеиспускательного канала
• из прямой кишки
• со слизистой глаза и нижнего века
• из цервикального канала
• из влагалища
• из зева
• с поверхности кожных высыпаний и язв

Кровь, секрет предстательной железы, вода, почва, смывы с поверхностей и даже продукты.

Применение ПЦР

• диагностика заразных заболеваний, в том числе венерических
• определение генетических заболеваний
• генотипирование, создание генотипического паспорта
• анализ ГМО продуктов и качества продуктов питания
• определение личности
• установление отцовства

На какие инфекции проверяет мазок на ПЦР

ПЦР чувствительна к любым известным микроорганизмам.

То есть способна выделить ДНК любого возбудителя: бактерии, вирусы, простейшие, грибы.

Список возбудителей, которые выявляются методом ПЦР, совпадает со списком инфекционных агентов, способных вызывать ИППП.

• сифилис
• трихомониаз
• хламидиоз
• микоплазма и уреаплазма
• гонорея
• ВПЧ
• мягкий шанкр
• гарднереллез
• генитальный или иной герпес
• донованоз
• цитомегаловирусная инфекция
• ВИЧ
• вирусные гепатиты
• контагиозный моллюск
• саркома Капоши
• кандидоз
• фтириаз
• чесотка

Когда назначается ПЦР

Имеет значение срок забора материала. Анализ будет информативен уже в продромальном периоде заболевания. В разгар инфекционного процесса результат достигается практически с гарантированной точностью.

Для определения эффективности лечения ПЦР назначают не ранее чем через 30-60 дней по завершении курса антибиотиков.

Технология забора мазка на ПЦР

Для женщин необходима некоторая подготовка к забору мазка, в том числе на ПЦР.

Подготовка к забору мазков:

• в день забора материала не мыться, не спринцеваться
• не мочиться минимум за 2 часа до забора
• мазки не собирают в период менструации и в течение 2 дней после нее
• накануне не применять антисептические и антибактериальные средства, в том числе местно (свечи, орошение, таблетки, инъекции)
• антибиотики должны быть приняты курсом, но первое исследование назначают через месяц после последнего приема

Рассмотрим, как именно берут мазок на Пцр у женщин.  Процедура выполняется врачом-гинекологом, урологом, венерологом или акушеркой при помощи стерильного тампона.

Им проводят по местам забора материала, по кругу, без нажатия:

• ​мочеиспускательный канал
• цервикальный канал
• стенка влагалища
• ​ампула прямой кишки
• слизистая глаза и нижнее веко
• задняя стенка глотки и миндалины

Тампон помещается в стерильную пробирку или им проводится по предметному стеклу с фиксатором. После чего материал доставляется в лабораторию.

Соскоб проводится тем же стерильным тампоном. Только вращательными движениями и с приложением некоторого усилия или специальной «щеткой». Далее щетка или тампон также помещается в стерильную пробирку или ими проводится по предметному стеклу.

Забор мочи на ПЦР осуществляется стерильный контейнер, первые 50 мл, не выделяя средней порции. Далее контейнер закрывается и доставляется в лабораторию.

С утра пациенту предлагают откашляться и отделить мокроту в стерильную посуду. Данное исследование используют для диагностики туберкулеза, хламидиоза и микоплазмоза.

Как берут кровь на ПЦР

Для сдачи крови в процедурную надо явиться натощак, накануне допустим только легкий ужин. При анализе методом ПЦР используется кровь из вены, для чего специальной иглой на вакутейнере производят прокол.

После присоединяют стерильную пробирку с пробкой к другому концу иглы. Под действием градиента давления (вакутейнер создает вакуум между иглой и пробиркой) кровь легко поступает в пробирку.

ПЦР крови на ВИЧ и гепатиты выполняется в реальном времени с определением концентрации ДНК (РНК) в плазме. Это исследование требуется для решения о назначении противовирусной терапии и прогноза степени риска передачи вируса от беременной к плоду.

Какой материал брать на исследование, решает врач исходя из клинической ситуации. Обычно мазки и моча используются для проведения ПЦР при определении возбудителей ЗППП.

Кровь на ПЦР забирается при постановке диагноза герпеса, цитомегаловируса, ВИЧ и гепатитов, а также токсоплазмоза.

Мазок на ПЦР из зева или, проще говоря, изо рта – при диагностике мононуклеоза и ЗППП: цитомегаловирус, ВПЧ, сифилис.

Мазок из ануса на ПЦР применяется при определении подавляющего большинства ЗППП.

Какие именно возбудители будут разыскиваться при помощи ПЦР – определяет врач- венеролог после осмотра.

Хранение и транспортировка ПЦР анализов

Стерильные емкости и предметные стекла категорически нельзя замораживать. Хранить в помещении не более двух часов, и только в крайних случаях – в холодильнике еще 20 часов.

Необходимость обеспечивать температурный режим транспортировке в специальную генетическую лабораторию обуславливает использование термоконтейнеров. В них поддерживается температура от 4 до 8 градусов Цельсия.

Поэтому очевидным плюсом медицинской организации является собственная лаборатория, способная выполнить полимеразную цепную реакцию.

Аналитический этап ПЦР диагностики

В лаборатории сперва выделяется ДНК из предоставленного образца.

Далее материал помещается в термостат в микроцентрифужных пробирках с добавлением амплификационной смеси на несколько часов.

Для сравнения выполняется контроль с известными ДНК определенных микроорганизмов. Выполняется электрофорез со смесью бромистого этидия и ДНК, что вызывает свечение в ультрафиолетовых лучах.

Электрофорез позволяет разделить продукты амплификации. При положительном результате теста они дают оранжевое свечение в коротком участке светового спектра.

Интерпретация результатов ПЦР анализа

При определении наличия ДНК (РНК) полимеразная цепная реакция считается положительной, и это точно демонстрирует наличие возбудителя.

Для диагностики вируса иммунодефицита человека и гепатитов В и С используют ПЦР с определением концентрации ДНК (РНК).

Для ДНК высокой считается концентрация 1,0 x 105 копи на такие инфекции как герпес, цитомегаловирус, ВИЧ и гепатиты, а также токсоплазмоз.

При диагностике ИППП используют несколько диагностических исследований. ПЦР позволяет довольно точно определить наличие определённого возбудителя уже в продромальный период развития инфекции.

Когда симптомы больше напоминают простуду, чем конкретное заболевание. Интересно также оценить напряженность иммунного ответа макроорганизма. Для этого назначаются серологические исследования ИФА, РПГА, РИФ и прочие.

Серология показывает, сколько антител и к какому именно антигену сформировалось, какая стадия заболевания наблюдается. Существует понятие «титр антител». То есть их количество, характеризующее напряженность, то есть выраженность иммунитета. Случается, что ответы разных исследований противоречат друг другу.

ПЦР является реакцией проверки, то есть именно по её положительному результату судят о наличии возбудителя. Например, если ПЦР положительна, а мазок на флору отрицательный.

Мы считаем, что в последнем случае в материал просто не попало нужного количества микроорганизмов. Или они не окрасились по разным причинам. Если ПЦР положительна, а серологические пробы отрицательны, то организм человека не вырабатывает иммунного ответа на возбудителя.

Наблюдается состояние иммуносупрессии, что бывает:

• при ВИЧ
• при приёме специальных лекарственных препаратов после трансплантации
• при лечении аутоиммунных заболеваний
• в период выздоровления после тяжёлой болезни
• при истощении или тяжелой хронической усталости

Если ПЦР отрицательна, а серологические пробы положительны, то нужно смотреть на фракцию иммуноглобулинов. IgM характерен для острой фазы течения заболевания при первичном заражении.

В такой ситуации врач может повторить забор материала. Или ориентироваться по точному, но длительно выполняемому культуральному методу (посев культуры возбудителя на питательные среды).

Высокий титр Ig A или IgG могут свидетельствовать о хронической инфекции в стадии обострения. А их низкие титры – просто о том, что пациент перенёс данное заболевание. Именно поэтому серологические пробы не используют для контроля эффективности лечения. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка.

При необходимости сдать ПЦР анализы обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник: https://onvenerolog.ru/zppp/pcr-u-zhenshhin.html

Мазок ПЦР: в каких случаях дают направление женщинам и мужчинам, как подготовиться и сдать, правила расшифровки

В гинекологии мазок ПЦР входит в перечень обязательных диагностических процедур. Он позволяет выявить наличие половых инфекций и не требует длительного ожидания результатов.

Мазок — это метод исследования, при котором врач берёт биологический материал с поверхности слизистых оболочек. Метод является малотравматичным и безболезненным, занимает мало времени и безопасен.

Определение заболеваний с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) обладает высокой точностью (до 99.6%) и специфичностью.

В каких случаях дают направление

В каких случаях дают направление

Этот вид исследования имеет сверхчувствительность и позволяет быстро получить результаты, что сделало ПЦР в гинекологии неотъемлемой частью диагностики в гинекологии. Врачи-урологи тоже часто прибегают к нему для постановки диагноза у мужчин.

Мазок ПЦР у женщин и мужчин выявляет:

• наличие скрытых инфекций, передаваемых половым путём: хламидиоз, уреаплазмоз, микоплазмоз, трихомониаз, вирус герпеса, в том числе его онкогенные штаммы;
• ВИЧ;
• вирусы гепатита A , B, C, D;
• вирусы краснухи, кори, паротита;
• вирус Эбштейна — Барр и цитомегаловирус;
• вирус папилломы человека;

Направление на обследование врач акушер-гинеколог даёт в следующих ситуациях:

• планирование беременности;
• тяжелое течение беременности, выкидыши в анамнезе
• острая мочеполовая инфекция во время беременности или обострение уже имеющегося хронического заболевания;
• незащищенный половой акт или наличие нескольких половых партнёров в течение последних 36 месяцев;
• при подозрении на наличие ИППП у женщин, когда другие методы обследования никаких патологических изменений не выявили;

Мазок на ДНК-исследование берут из цервикального канала, заднего свода влагалища и уретры специальной щёточкой, которая не травмирует слизистые оболочки.

Для получения точного результата важно, на какой день цикла вы пришли сдавать мазок на инфекции.

Гинеколог заранее обговаривает, что на момент визита менструальные кровотечения должны закончиться, лучше всего сдавать анализ во второй половине менструального цикла.

После забора материала на ИППП у женщин, что в среднем составляет три минуты, весь собранный материал переносится в пробирку и помещается в специальный аппарат (амплификатор).

Суть его работы состоит в нахождении участков генетического кода патологического агента и их копировании, дальнейшей идентификации, обработке информации и выдаче уже готовых результатов.

Стоит отметить, что ещё один из плюсов — это возможность комплексной диагностики: при проведении теста может быть обнаружено несколько патологических агентов.

Правила подготовки для женщин и мужчин

Правила подготовки для женщин и мужчин

Достоверную информацию о наличии или отсутствии заболевания можно узнать, если соблюдать все правила подготовки к анализу.

ПЦР мазок для анализа делают мужчинам и женщинам по направлению акушера, гинеколога или уролога. Материалом в данном случае служит соскоб из влагалища или уретры.

В зависимости от целей диагностики на исследование забирают кровь, слюну или сперму.

Подготовка к сдаче ПЦР у мужчин и женщин во многом имеет общие черты, а также свои особенности:

• минимум за 30 дней до сдачи анализа следует прекратить приём любых препаратов, влияющих на результат (антибиотики, противовирусные, противогрибковые, противопротозойные, иммуномодуляторы)
• женщине записаться на приём к врачу нужно после месячных, не раньше, чем через 4-5 дней после последней менструации. Иногда возникают ситуации, при которых возникает вопрос: «Можно ли сдавать мазок во время месячных?». Гинекологи настоятельно не рекомендуют этого делать, чтобы избежать возможной инфекции и получить максимально точный результат;
• за два дня до процедуры следует сохранять половой покой
• подготовка к ПЦР начинается уже накануне — вечером необходимо принять ванну. Утром перед процедурой пользоваться душем нельзя, это снизит эффективность диагностических мероприятий.
• последнее мочеиспускание должно быть минимум за 2- 2.5 часа перед процедурой
• при сдаче крови запрещено употреблять пищу и пить жидкость

При соблюдении этих простых правил полученные мазки для ПЦР-исследования будут максимально информативными, и вам не придётся сдавать их вновь.

Мазок ПЦР при беременности

Мазок ПЦР при беременности

Проведение ПЦР при беременности необходимо в случаях подозрения на наличие возбудителей половых инфекций.

Патогенные микроорганизмы могут распространяться вертикальным путём от матери к плоду через плаценту и вызывать у него различные аномалии развития, несовместимые с жизнью.

Все диагностические мероприятия в акушерстве направлены на раннее выявление и лечение урогенитальной инфекции, поэтому здесь незаменимым методом становится полимеразная цепная реакция.

Многие будущие мамы боятся проведения манипуляции, ссылаясь на то, что может случиться выкидыш. Это связано с непониманием того, как берётся ПЦР-мазок у беременных женщин.

При взятии материала из влагалища или уретрального канала нет никакой угрозы ни для матери, ни для плода: биологический материал аккуратно забирается со слизистой оболочки специальной щёткой без повреждения тканей. Обследование обладает высокой диагностической ценностью для исключения инфекционной патологии у беременных.

Оно проводится в качестве скрининга при первом обращении к гинекологу, потом при необходимости назначаются повторные исследования. Правила сдачи ничем не отличаются от установленных для всех, сдавать мазок на ПЦР можно даже на поздних сроках вынашивания ребёнка.

Как сдавать и через сколько готов результат

Как сдавать и через сколько готов результат

Большинство посетителей клиники испытывает лёгкий страх перед тем, как сдавать анализы. Процедура является полностью безопасной и безболезненной, количество осложнений при её проведении стремится к нулю.

Забор для лабораторной диагностики проводится по предварительной записи, ведь к визиту врача необходимо подготовиться. Легче всего подготовиться к анализу крови, никаких ограничений здесь нет.

Сдача крови осуществляется натощак, забор материала происходит из вены в объеме до 10 мл. Мазок методом ПЦР делают со слизистых шейки матки (из цервикального канала), уретры и влагалища.

Каждое предметное стекло маркируется в зависимости от отдела, откуда брали материал, латинскими буквами C, V, U и направляется в лабораторию. Сколько будет готовиться результат во многом зависит от лаборатории и её загруженности. В среднем, срок составляет двое суток. В экстренных случаях время выполнения может сократиться до нескольких часов.

Правила расшифровки результатов

Правила расшифровки результатов

Неоспоримым преимуществом метода ПЦР является его доступность, сверхточный анализ мазка и исключение ложноположительных и ложноотрицательных тестов. Все возбудители половых инфекций идентифицируются данным исследованием, вероятность ошибки составляет менее 0.5%.

ПЦР-анализ позволяет определить минимальные содержания вируса в организме. Сам аппарат распознает единичные фрагменты ДНК или РНК и многократно их копирует в пробирке, затем анализирует и выдает результат на бумагу.

Если процесс копирования (репликации) генома вируса прошёл успешно, то результат будет положительным.

Источник: https://ozppp.com/zppp/mazok-ptsr.html

Анализ ПЦР — самая точная диагностика на инфекции

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это современный инструмент диагностики разнообразных инфекций, отличающийся высокой точностью. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний, опираясь на их генетический материал (РНК или ДНК). Биологическим материалом для исследования может служить кровь, мазок из половых органов, слюна и прочее. НАЖМИТЕ, ЧТОБЫ ЗАПИСАТЬСЯ

Метод ПЦР  был открыт в 1983. Его создатель Кэри Мюллис (США), за это открытие получил Нобелевскую премию в области химии. Уже за первые десять лет методика стала обязательным лабораторным исследованием во всем мире, получив признание ученых и врачей.

Медицинский центр Диана предлагает провести исследование по методике полимеразной цепной реакции в кратчайшие сроки и с высочайшим уровнем точности. Наша диагностическая база соответствует всем международным стандартам и требованиям.

Какие инфекции можно диагностировать методом ПЦР

На диагностику отправляют гинеколог, уролог или дерматолог. Анализ ПЦР дает возможность диагностировать большое число разнообразных инфекций. В эту группу попадают и скрытые, бессимптомные заболевания, находящиеся в инкубационном периоде:

С помощью метода ПЦР можно обнаружить:

• гепатит C, B;
• уреаплазмоз половых органов;
• ИППП – уреаплазмоз, трихомониаз, гарднереллез,;
• хламидиоз половых органов и дыхательных путей;
• микоплазмоз половых органов и дыхательных путей;
• бактериальный вагиноз;
• кандидоз половых органов;
• инфекционный мононуклеоз;
• туберкулез;
• сальмонеллез;
• туберкулез (легочные и внелегочные формы);
• листериоз, клещевые энцефалиты, болезнь Лайма;
• цитомегаловирусную, папилломавирусную, герпесную  инфекцию;
• детские заразные болезни, выявляемые при беременности и до зачатия — краснуху, паротит, дифтерию, корь;
• ВИЧ.

При каждом из вышеперечисленных заболеваний, обнаруженным другим методом, желательно делать и ПЦР — исследование. Возбудители многих инфекций имеют несколько типов (штаммов), а более точная диагностика делает лечение эффективнее.

Поскольку разные типы возбудителей обладают своими способами передачи инфекции, точное определение возбудителя помогает уберечь от заражения окружающих.

Например, гепатитом А можно заразиться через общие предметы и посуду (болезнь грязных рук), а гепатитом С — только через кровь, медицинские инструменты и половые контакты. Это важно для тех, кто находится рядом с больным.

Суть метода полимеразной цепной реакции

Метод основан на выявлении возбудителя по участкам ДНК или РНК. ПЦР напоминает криминалистику, когда преступника находят по частичкам кожи или волосам, оставленным на месте преступления. Поскольку каждый живой организм имеет уникальную структуру ДНК или РНК.

Метод позволяет безошибочно идентифицировать микроорганизм, даже если он присутствует в исследуемом материале в минимальных количествах.

ПРЦ подходит для выявления скрытого носительства, нетипичных, стертых и прочих форм заразных заболеваний. Диагностика отличается высокой точностью, поэтому практически не дает ошибок и ложных результатов.

Анализ часто назначается, как дополнительное обследование, чтобы выявить конкретный тип вируса или микроба.

Достоинства и недостатки метода ПЦР

Анализ ПЦР – результативный диагностический инструмент, позволяющий врачу не только правильно определить тип инфекционного возбудителя в организме больного, но также и количество микробов. Эта особенность позволяет методу ПЦР эффективно обнаруживать и хронические инфекции, к примеру, вирусный гепатит.

Преимущества методики заключаются в следующих особенностях:

• Универсальность. Метод дает возможность определить все известные на сегодняшний день микроорганизмы, вне зависимости от вида исследуемого материала.
• Специфичность. ПЦР позволяет определить ДНК вируса или бактерии со 100% точностью, что не дает ни один другой способ диагностики.
• Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован, благодаря быстрой реакции образования копий.
• Оперативность – поставить диагноз на основании полимеразной цепной реакции можно уже через несколько часов после забора биологического материала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
• Возможность проведения количественного анализа. Эта особенность важна при выявлении болезней, вызванных условно-патогенной флорой (например, молочницы). Повышенное содержание грибков кандида  в организме вызывает заболевание, а нормальное количество до 10 3 — 104 КОЕ/тамп. – нет.

Недостатки ПЦР-диагностики – это необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах. Для анализа нужен специальный бокс-ламинар, где поддерживается необходимая температура и обеспечивается чистота эксперимента.

Как сдать анализ ПЦР правильно: подготовка 

Чтобы понять, как именно следует подготовиться к предстоящему анализу ПЦР, пациент должен обязательно уточнить у своего врача, какой именно биологический материал планируется взять. От этого непосредственно зависит подготовка.

• Выделения из половых органов, мазок из шейки матки или мочеиспускательного канала, моча – посредством исследования данных вариантов материала методом ПЦР эффективно диагностируются инфекции половых органов.
• Вирусный гепатит C, ВИЧ инфекция требуют взятие крови на анализ ПЦР.
• С помощью мазка из зева можно подтвердить или опровергнуть факт наличия инфекционного мононуклеоза.

Мазок у женщин

Для диагностики половых инфекций методом ПЦР у женщин, как правило, берут . При беременности действуют стандартные правила подготовки к анализу ПЦР.

• За пару дней до проведения ПЦР нужно отказаться от спринцеваний, средств интимной гигиены.
• За неделю до анализа на инфекции стоит перестать применять любые виды лекарственных препаратов, разумеется, если они не входят в программу подготовки к анализу ПЦР, прописанную врачом.
• За пару дней до обследования нужно начать воздерживаться от полового акта.
• Подмывание в день анализа ПЦР не нужно, гигиена половых органов проводится накануне вечером, используется только теплая вода.
• За пару часов до сдачи анализа мочиться нельзя.

Мазок у мужчин

Подготовиться к забору мазка из мочеиспускательного канала для проведения ПЦР несложно. Достаточно соблюдать изложенные ниже правила.

• За 2 суток до ПЦР обследования нужно начать воздерживаться от сексуальных отношений.
• Прием лекарств прекращается приблизительно за 7 дней до проведения анализа, если, конечно же, они не были специально назначены врачом.
• Гигиена половых органов должна проводиться накануне вечером, в день анализа ПЦР это делать не стоит.
• Рекомендуется не мочиться примерно 2-3 часа перед сдачей анализа.

Анализ крови

Если в процессе ПЦР анализа объектом изучения станет кровь пациента, правила подготовки к нему следующие.

• Оптимальное время для сдачи крови – утро, анализ нужно обязательно сдавать натощак (минимум 8 часов отсутствия пищи). Воду можно пить свободно.
• Отказ от алкоголя за сутки до ПЦР анализа, отказ от курения за час до него.
• Если здоровье допускает такой вариант, от приема лекарственных средств рекомендуется на время отказаться.
• Перед сдачей проб крови в обязательном порядке следует отдохнуть около 20 минут.
• Накануне ПЦР исследования совершенно исключены эмоциональные и физические перегрузки, они могут сказаться на результатах анализа.

Как проводится тест ПЦР?

Для исследования берется любая среда, в которой может находиться возбудитель, но чаще всего используются:

• Кровь сыворотка или плазма – для выявления множества возбудителей – вирусов гепатита B, C, D, G, герпеса, ВИЧ, цитомегаловируса;
• Моча и сок простаты – при диагностике ЗППП;
• Мокрота, плевральная жидкость, бронхоальвеолярный лаваж – для диагностики легочных и внелёгочных форм туберкулеза;
• Спинномозговая жидкость – для диагностики инфекций нервной системы;
• Околоплодная жидкость – для определения внутриутробных заражений;
• Мазок из зева – для выявления возбудителей инфекционного мононуклеоза и дифтерии; соскобы и мазки со слизистых  для диагностики ЗППП; клетки слизистой желудка и желудочный сок — для выявления бактерии хеликобактер, вызывающей гастрит и язву.

При одном взятии материала можно обнаружить сразу нескольких возбудителей, попавших в организм. Такая универсальность избавляет пациента от дополнительных обследований и лишних трат.

Обнаружить и идентифицировать участки генетической информации удается при помощи специальных эталонных маркеров ДНК (праймеров) созданных для каждого известного возбудителя. Эталон позволяет найти «свой» фрагмент среди миллионов других.

Если это происходит, запускается реакция полимеразной цепи.

ПЦР—реакция делает огромное число копий выявленного участка генной информации (репликацию). Важно, что реплицируются только участки ДНК и РНК, необходимые для проведения анализа. Поэтому так важны чистота эксперимента и умение персонала обращаться с аппаратурой и образцами.

Цепная реакция протекает очень быстро, уже через два часа участок ДНК увеличивается в миллионы раз, что позволяет обнаружить и точно идентифицировать инфекцию. Для работы с эталонами пробирки помещают в специальный прибор.

При помощи программы задается алгоритм, несколько раз меняющий температуру среды и влияющий на протекание реакции. Результат ПЦР виден сразу после окончания исследования.

Как расшифровать ПЦР анализ

Проведение ПЦР исследования позволяет не просто установить тип инфекции, присутствующий в организме больного, но и оценить его с количественной точки зрения (количество микробов). Расшифровка результатов количественного анализа ПЦР играет важную роль в обнаружении и проверке эффективности лечения большого числа хронических заболеваний, скажем гепатита C.

Результатом анализа ПЦР могут стать положительный и отрицательный ответы.

• Отрицательный результат. Следы инфекции не были выявлены в биологическом материале, который являлся объектом исследования в процессе анализа ПЦР. Как правило, на основании отрицательного результата можно полагать, что в организме действительно отсутствует инфекция.
• Положительный результат. Такой результат анализа ПЦР свидетельствует о том, что следы инфекционного заболевания присутствуют в биологическом материале пациента. Положительный результат анализа ПЦР характеризуется большой степенью точности.

Иногда инфицирование выявляется на фоне полного здоровья и отсутствия признаков заболевания. Некоторые больные считают, что анализ сделан неправильно, но реальная ситуация другая. Если ПЦР показала, что возбудитель в организме есть, значит, он там действительно находится.

Просто инфекционные болезни никогда не начинаются сразу после заражения, имея инкубационный период различной продолжительности.

Скрытый период может продолжаться очень долго, например, при СПИДе – несколько лет, пока какие-то механизмы не подтолкнут вирусы к размножению. Возбудитель определяется в организме носителей и тех, кто не долечился.

Очень часто переходят в скрытую (латентную) форму различные ЗППП. В этом случае может понадобиться дополнительная лабораторная диагностика.

Точность расшифровки результатов ПЦР анализа

Метод ПЦР, позволяющий выявлять достаточно большое число инфекций, характеризуется повышенной точностью, чувствительностью и специфичностью. Эти характеристики говорят о том, что с помощью исследования ПЦР можно:

• Максимально точно установить отсутствие или присутствие инфекционного возбудителя.
• Максимально точно определить конкретную разновидность инфекционного возбудителя (специфичность).
• Выявить инфекцию даже в том случае, когда она имеет скрытый характер. Речь идет о низком уровне присутствия в подвергаемом исследованию биологическом материале пациента ДНК микробов (чувствительность).

Преимущества метода ПЦР над иммуноферментным анализом и прочими иммунологическими инструментами выявления инфекции заключается в том, что он реже дает ошибочные результаты. То есть расшифровка анализа ПЦР значительно реже показывает отсутствие инфекционных микробов, если они есть в организме больного.

Кроме того, почти не бывает, чтобы расшифровка анализа выявляла наличие в организме несуществующей инфекции, то есть давала ложноположительные результаты.Разумеется, стопроцентно правильными результаты ПЦР назвать все же нельзя, поэтому необходимо обязательно дополнять это исследование другими методиками.

, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter

ссылкой:

TORCH, анализы, анализы гинекология, анализы до беременности, анализы на инфекции, анализы урология, гарднереллез, герпес, инфекции, мазок, ПЦР, трихомониаз, уреаплазмоз, урология, хламидиоз

Источник: https://medcentr-diana-spb.ru/analizyi/analiz-ptsr-tochnyiy-analiz-na-infektsii/

Подготовка к анализу и сдача мазка на ПЦР

ПЦР расшифровывается как полимеразная цепная реакция, которая применяется в различных исследованиях около 30 лет. ПЦР получила широкое распространение в разнообразных отраслях науки, начиная от археологии, генетики и криминалистики и заканчивая венерологией. Метод ПЦР в медицине позволяет установить отцовство, определить инфекционного возбудителя или хромосомную либо генную патологию.

Метод ПЦР по праву считается высокоточным и эффективным способом диагностики, позволяющим выявить и идентифицировать различные вирусные/инфекционные и наследственные болезни.

Данный способ диагностики отличается тем, что дает возможность определить инфекционную или вирусную патологию не только в острой либо хронической стадии, но в инкубационный период, то есть в промежуток времени от момента заражения до появления первых клинических признаков.

Также характерной особенностью метода ПЦР является его специфичность, что исключает получение ложноположительного результата. С помощью ПЦР определяется не только ДНК или РНК, принадлежащей тому либо другому микроорганизму или вирусу, но и их концентрация в исследуемом биоматериале. Таким образом, метод ПЦР осуществляет качественный и количественный анализ ДНК/РНК.

Суть метода ПЦР заключается в обработке биоматериала специальными реактивами, что позволяет выявить чужеродную ДНК. Многократное повышение концентрации ДНК/РНК добиваются с помощью ферментов, добавленных при исследовании биоматериала.Для исследования используются различные жидкости и эпителий человеческого организма. Это может быть кровь, плазма, моча, сперма, сок предстательной железы, вагинальные выделения, соскоб из половых путей и уретры и прочее.

Достоинства диагностики с помощью ПЦР

Положительными моментами метода ПЦР считаются:

• выявление и идентификация инфекционного возбудителя (даже при отсутствии клинических и других лабораторных данных);
• одновременное обнаружение нескольких возбудителей инфекции при использовании одного биологического образца;
• высокая чувствительность метода, исключающая перекрестные реакции;
• исключение получения ложноположительных реакций.

Какие инфекции выявляют методом ПЦР

С помощью метода ПЦР возможно определить в организме человека следующие инфекции:

• вирус гепатита (А, В, С, на А ни В, Д);
• цитомегаловирус;
• вирус герпеса;
• ВИЧ;
• энтеровирус;
• токсоплазмоз;
• возбудители краснухи, коклюша, листериоза;
• кисломолочные грибы (урогенитальный кандидоз);
• уреаплазма;
• микоплазма;
• хламидии;
• вирус папилломы человека;
• возбудитель инфекционного мононуклеоза.

Как подготовиться к сдаче мазка на ПЦР

Врач, назначая день сдачи мазка на ПЦР, учитывает день менструального цикла пациентки. Оптимально сдавать мазок накануне месячных или через 3 — 4 дня после их окончания.

Мазок на ПЦР исключается брать в период кровянистых выделений, включая менструальные и дни и время ациклического кровотечения, иначе в соскоб попадет кровь, что затруднит проведение анализа или сделает его выполнение невозможным (поскольку анализ методом ПЦР платный — деньги пропадут).

Несмотря на то, что процедура забора мазка из половых путей проста, врачи рекомендуют соблюсти ряд мер перед сдачей анализа:

• отказаться от использования вагинальных суппозиториев, тампонов, таблеток за 3 дня до сдачи мазка;
• пролечиться по поводу обильных влагалищных белей и только после лечения сдавать мазок;
• отказаться от половых контактов за 3 суток до забора биоматериала;
• воздержаться от применения средств интимной гигиены накануне и в день взятия мазка (подмываться чистой водой);
• отказаться от спринцеваний за день до сдачи мазка.

Также необходимо учитывать следующее: при проведении антибиотикотерапии (по любому поводу) мазок из половых путей берется через 3 недели после окончания лечения. Перед забором мазка нет нужды соблюдать какие-либо ограничения по питанию и физической активности.

Процедура взятия мазка

Забор биоматериала у женщин на скрытые половые инфекции производится из трех точек: мочеиспускательного канала, канала цервикса и влагалищных стенок. Как правило, производится взятие мазка из цервикального канала. Схема последовательных действий:

• пациентка укладывается на гинекологическое кресло;
• врач в стерильных перчатках производит осмотр наружных половых органов, вводит во влагалище гинекологическое зеркало и удаляет слизь с наружного зева и из влагалища ватным тампоном;
• забор мазка из цервикального канала производится специальной одноразовой щеточкой, которая соскабливает эпителий;
• полученный материал вместе со щеточкой помещают в стерильную пробирку, плотно укупоривают ее и отправляют в лабораторию.

Взятие материала из шеечного канала и стенок влагалища является безболезненной процедурой, но в некоторых случаях женщина испытывает легкий дискомфорт и раздражение в ходе процедуры.

Получение результатов и их расшифровка

В большинстве случаев результаты анализа мазка методом ПЦР можно получить уже на следующий день. По показаниям возможно получение результатов в день исследования пациентки. Расшифровка анализа не составляет трудностей. Если возбудитель предполагаемой инфекции отсутствует, то в анализе ставится прочерк (отрицательный результат).

При обнаружении ДНК/РНК тех или иных инфекционных агентов в биоматериале напротив перечисленных инфекций ставятся плюсы (положительный результат). Обнаружение скрытой половой инфекции требует назначения лечения женщине и ее постоянному половому партнеру.

После окончания лечения (спустя 3 недели) производится новый забор биоматериала (контроль эффективности противовоспалительной и антибактериальной терапии).

Показания для сдачи мазка на ПЦР из половых путей

Сдача мазка на скрытые половые инфекции методом ПЦР показано в случае:

• наличия признаков воспаления в мочеполовом тракте;
• незащищенного полового акта со случайным партнером;
• наличия трех и более половых партнеров в течение года;
• бесплодия;
• планирования беременности;
• проведения ЭКО и других методик ВРТ;
• планирования операции на половых органах.

Что выявляет мазок на ПЦР

Исследование биоматериала из половых путей методом ПЦР выявляет:

• гонококков;
• трихомонад;
• хламидии;
• герпетическую инфекцию;
• микоплазмы и уреаплазмы;
• вирус папилломы человека;
• гарднереллы;
• грибы.

Обычно производится исследование на весь спектр перечисленных инфекций. У большинства пациенток определяется две или более инфекции.

Количество прочтений: 1073 29.01.2020

Источник: https://ginekologi-msk.ru/info/articles/podgotovka-k-analizu-i-sdacha-mazka-na-ptsr/

Гинекологический мазок в ПЦР-методике

Взятие гинекологического мазка с последующим исследованием его с помощью ПЦР открывает возможности для диагностики инфекций, передаваемых половых путём. Открыто данное исследование было в 80-х годах 20 века.

Ученый, разработавший его, получил Нобелевское вознаграждение. Открытие позволяет узнавать возбудителя заболеваний при его минимальной концентрации в половых путях.

Высокая точность инновационной ПЦР-диагностики делает её незаменимым исследованием во многих сложных клинических случаях.

Методика исследования

Суть метода полимеразной цепной реакции заключается в размножении участка ДНК. Порой для возникновения симптомов определённых заболеваний необходима мизерная концентрация бактерий или вирусов.

Большинство микробиологических исследований не могут обнаружить патогенные организмы в таком разведении, а тем более их с точностью подсчитать.

В таких случаях только и выручает метод активного полимеразного наращивания.

ПЦР-диагностика требует для исследования участок ДНК, который подвергается клонированию.

К биологическому материалу добавляют различные реагенты, которые комплиментарно достраиваются к участкам выделенного генетического материала.

Многократное преумножение ДНК позволяет определить не только род, но и вид бактериологического или вирусного материала. Уточнение вида возбудителя делает лечение максимально эффективным и этиотропным.

Мазки ПЦР в гинекологии позволяют выделить возбудителей хламидиоза, гонореи, микоплазмоза, уреаплазмоза и многих других опасных инфекций. Часто эти заболевания долго существуют в скрытых, латентных формах и долго не проявляются клиническими симптомами. ПЦР позволяет выявить их на ранних стадиях и наиболее своевременно начать лечение.

Среди явных преимуществ полимеразной реакции выделены:

1. Высокая точность определения природы патогенного микроорганизма.
2. Возможность выделения вируса или бактерии при мизерных их концентрациях в биологическом материале.
3. Анализы проводятся достаточно быстро.
4. Заражение некоторыми микроорганизмами можно выявить только с помощью ПЦР. Вирус иммунодефицита также возможно выделить иди подтвердить с помощью данного диагностического мероприятия.

Исследование в гинекологии

В гинекологической практике мазок на ПЦР используется довольно широко. Ведь он позволяет выявить возбудителей большинства воспалительных заболеваний женских половых органов наружной и внутренней локализации. Анализ проводят женщинам, активно живущим половой жизнью, беременным пациенткам и проходящим прегравидарную подготовку.

• Мазок ПЦР на ИППП нередко выявляет не только опасные бактериальные инфекции, но и заражение вирусами герпеса или папилломы человека. Последние и вовсе являются онкогенными провокаторами, излюбленным местом которых является ткань шейки матки.
• ПЦР помогает выявить хламидии у беременных женщин, которые не обследовались на данную инфекцию до зачатия. Бактерия может вызывать различные уродства и пороки развития плода, а также вовсе прекращать его развитие. Носительство хламидий может долгое время не проявляться, быть выявлено лишь во время беременности как причина внутриутробной гибели зародыша. Но и при своевременном обнаружении бактерий у женщин «в положении» предоставляется возможным провести лечение без урона для матери и плода.

Является ошибочным мнение, что взятие мазков ПЦР на ИППП при беременности создает угрозу выкидыша.

Соскоб для исследования действительно берут из шейки матки, но таким образом, что не затрагивают растущий эмбрион.

К тому же, данная анатомическая область по длине составляет около 4 см вне беременности и несколько уменьшается на поздних сроках гестации. Это позволяет достаточно безопасно взять материал для исследования.

1. Пациенткам рекомендуется не мочиться 2-3 часа до выполнения соскоба из шейки матки.
2. За день до взятия материала необходимо отменить прием антибактериальных и бактериостатических средств.
3. Вне беременности лучше сдавать мазок в середине менструального цикла. Неблагоприятным периодом считается время до начала менструального кровотечения или сразу после него.
4. 2-3 дня не рекомендуется использовать локальные средства контрацепции или любые другие вагинальные медикаменты.
5. Сутки до исследования нельзя иметь половые отношения.
6. Накануне взятия пробы запрещается принимать душ и обмывать наружные половые органы.
7. Нельзя брать соскоб из шейки матки в тот же день, когда проводилось кольпоскопическое исследование.

Довольно простые рекомендации позволят наиболее точно определить заболевание, передающееся половым путем, по генетическому материалу его возбудителя.

Показания для ПЦР

Полимеразная реакция как метод диагностики представляет собой новый и инновационный способ идентификации микроорганизмов. К его помощи активно прибегают в следующих случаях:

1. При установлении причин бесплодия. Невозможность зачать ребенка часто связана с инфекцией половых органов, которую тяжело распознать обычными способами. Латентное течение многих инфекций определяет склонность к прерыванию беременности, несостоятельности имплантации плодного яйца.
2. При установленной природе инфекционного возбудителя ПЦР проводится для выяснения фазы заболевания: острой или хронической.
3. Мазки ПЦР у женщин берут в случае тяжело протекающих беременностей. Внутриутробные инфекции, приобретенные до беременности и в ее активное течение, вызывают задержку развития и гибель плода. Рождение детей с аномалиями развития заставляет обследовать мать повторно в послеродовом периоде.
4. В ходе диагностической процедуры возможно установить также чувствительность и устойчивость микроорганизмов к антибиотикам.

Несмотря на кажущуюся сложность, проведение полимеразной реакции продолжатся не более 4 дней. Это время необходимо для построения полноценной молекулы ДНК, которую удается идентифицировать с конкретным микроорганизмом. Взятие биологического материала как субстрата для анализа и вовсе занимает до 5 минут.

Результат ПЦР-метода имеет два варианта интерпретации: позитивный либо негативный:

• Положительный ответ полимеразной реакции подтверждает наличие в материале микробных следов, а также указывает род и вид возбудителя.
• Отрицательный результат говорит о стерильности биологического материала, отсутствии бактерий и вирусных частиц.

На основе расшифровки мазка врач определяется с методикой лечения.

Этиотропные антибиотикотерапия или противовирусное лечение позволяют быстро и бесследно очистить микрофлору от возбудителя опасных инфекций.

Своевременная диагностика не позволяет навредить и растущему плоду во время беременности матери – при проведении терапевтических курсов эрадикации возбудителей инфекций, передающихся половым путем.

Источник: http://ZdorovieLedy.ru/diagnostika/mazok-pcr-v-ginekologii.html